TOP泉州盤點(diǎn)-藍(lán)白斑篩選的原理
藍(lán)白斑篩選原理圖解,藍(lán)白斑篩選的原理及應(yīng)用
藍(lán)白斑篩選是一種常見的基因工程技術(shù),它可以被用來(lái)快速、準(zhǔn)確地鑒定純合或雜合突變體。
藍(lán)白斑篩選原理如下:質(zhì)粒DNA中通常會(huì)含有兩個(gè)關(guān)鍵基因:一是β-半乳糖苷酶(Galactosidase),它是一種酶,能夠?qū)⒁粋€(gè)特定的底物X-Gal轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)色的產(chǎn)物,從而形成藍(lán)色斑點(diǎn),是一個(gè)可見的標(biāo)記;另一個(gè)是谷氨酰胺合成酶(Ampicillin),它是一種抗生素,能夠抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。
在藍(lán)白斑篩選中,會(huì)將DNA突變體插入到這兩個(gè)基因之間,突變體會(huì)對(duì)其中一個(gè)或兩個(gè)基因產(chǎn)生影響。如果插入突變體對(duì)β-半乳糖苷酶基因產(chǎn)生了破壞作用,那么細(xì)菌對(duì)X-Gal的轉(zhuǎn)化就會(huì)失活,從而無(wú)法生產(chǎn)出藍(lán)色的產(chǎn)物,細(xì)胞在培養(yǎng)基上就不會(huì)形成藍(lán)色斑點(diǎn);反之,如果插入突變體對(duì)谷氨酰胺合成酶基因產(chǎn)生破壞作用,那么細(xì)菌在含有抗生素的培養(yǎng)基中就會(huì)失活,只有那些含有突變體的細(xì)胞能夠生存下來(lái)。
通過(guò)這種方法,我們可以輕松地鑒定突變體的純合性或雜合性,并對(duì)其進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究。同時(shí),這種方法也被廣泛地應(yīng)用于基因工程領(lǐng)域中的基因克隆、表達(dá)、定位和突變等研究中,是一種非常有效的技術(shù)手段。
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